Kininogen o wysokiej masie cząsteczkowej jest inhibitorem kalpainy płytkowej.

Ostatnie badania z naszego laboratorium wskazują, że wysokie stężenie aktywowanej wapniem proteazy cysteinowej (kalpainy) może odszczepić kininogen o wysokiej masie cząsteczkowej (HMWK). W przypadku immunodyfuzji i immunoblotu, surowica odpornościowa skierowana na łańcuch ciężki HMWK wykazała immunochemiczną identyczność z inhibitorem proteazy alfa-cysteiny – głównym inhibitorem plazmy kalpain tkankowych. Następnie rozpoczęto badania w celu ustalenia, czy HMWK oczyszczony lub w osoczu był także inhibitorem kalpainy płytkowej. Oczyszczony inhibitor proteazy alfa-cysteiny, alfa-2-makroglobulina, jak również oczyszczony łańcuch ciężki samego HMWK lub HMWK hamowały oczyszczoną kalpainę płytkową. Analiza kinetyczna wykazała, że HMWK hamował niekompetycyjną kalpainę płytek krwi (Ki w przybliżeniu równe 5 nM). Inkubacja kalpainy płytkowej z HMWK, alfa-2-makroglobuliną, oczyszczonym łańcuchem ciężkim HMWK lub oczyszczonym inhibitorem proteazy alfa-cysteiny w podobnych warunkach dała IC50 odpowiednio 36, 500, 700 i 1700 nM. Zbadano udział tych białek w osoczu w hamowaniu kalpainy płytkowej. Normalne osocze zawierało białko, które nadawało pięciokrotnie sześciokrotnie większe IC50 oczyszczonej kalpainy płytkowej niż osocze z niedoborem HMWK lub całkowitego kininogenu. Rekonstytucja całkowitego niedoboru kininogenu w osoczu z oczyszczonym HMWK do prawidłowych poziomów (0,67 mikroM) całkowicie skorygowała podnormalną aktywność hamującą. Jednak rekonstytucja osocza z niedoborem HMWK do normalnego poziomu kininogenu o niskiej masie cząsteczkowej (2,4 mikroM) nie w pełni skorygowała podnormalną zdolność hamowania kalpainy tej plazmy. Badania te wskazują, że HMWK jest silnym inhibitorem, a także substratem kalpainy płytkowej oraz że osoczowe i komórkowe kininogeny mogą działać jako regulatory cytosolowych proteaz cysteinowych aktywowanych wapniem.
[patrz też: spastyka, skrzydlik, stenoza kanału kręgowego ]